ELISA souprava je určená pro kvantitativní stanovení lidského fosforylovaného filamentu H v seru, CSF, vzorku tkáně nebo plazmě.
Neurofilamenta (NF) jsou v průměru 10 nm vlákna, jsou nejhojnější proteinovou složkou neuronů a koncentrují se převážně v axonech. Patří k protein/genové rodině 10 nm intermediárních filament, která zahrnuje i keratiny, jež jsou hlavní strukturální složkou pokožky.
Neurofilamenta (NF) se skládají převážně ze tří podjednotek: NF-L (low-lehká), NF-M (medium– střední) a NF-H (heavy, high-těžká). NF-H je protein o velikosti 200 kDa, který obsahuje neobvykle se vícenásobně opakující sekvence lysin-serin-prolin (KSP), přičemž v axonálních neurofilamentech jsou v podstatě všechny serinové jednotky silně fosforylované. Vzhledem k tomu, že fosforylované formy NF-H (pNF-H) jsou rezistentní vůči proteázám, pNF-H uvolňované z poškozených a nemocných axonů zůstávají v tekutinách v nedegradované formě. To znamená, že detekce pNF-H v krvi a mozkomíšním moku jednoznačně poukazuje na neuronální poškození v důsledku skutečnosti, že pNF-H se nachází výlučně v neuronech.
Tento protein může být ve velkém množství detekován po experimentálním poškození míchy a mozku u krys. Hladiny pNF-H vyšší než 100 ng/ml byly detekovány v krvi po závažném poškození míchy a nižší, ale přesto snadno detekovatelné hladiny, byly nalezeny v krvi zvířat, kterým byl experimentálně poškozen mozek. V nedávných studiích na krysách, které byly vystaveny traumatickému poranění mozku (traumatic brain injury-TBI) s použitím modelu CCI (controlled cortical impact) byly zjištěny zvýšené krevní hladiny pNF-H. Výsledky ukazují časově závislé změny v detekovatelných hladinách pNF-H a tyto hladiny odpovídají závažnosti poranění a množství kortikálního poškození.
Studie transgenních myší s mutací v lidském genu „copper/zinc superoxide dismutase 1“, který souvisí s amyotrofní laterální sklerózou (ALS), poukázala na zvyšující se množství pNF-H v jejich krvi. U těchto myší se vyvinula patologie axonální degenerace podobná lidskému onemocnění ASL a krevní hladiny pNF-H v krvi mohou být použity k monitorování této degenerace. Zajímavé je, že pNF-H je zjistitelná před propuknutím zjevných příznaků choroby.
Další experimenty ukázaly, že pNF-H je detekovatelné v plazmě u lidí trpících zánětem zrakového nervu a jeho zvýšená hladina byla také zaznamenána v mozkomíšním moku jedinců s nádory mozku a mozkovou mrtvicí.
Typ: sendvičová ELISA s protilátkou značenou avidin-peroxidázou (HRP)
Celková doba analýzy je kratší než 4 hodiny
Klinické použití a oblasti zkoumání:
-markery nervové tkáně
-onkologie
Dokumenty naleznete zde.
