Pro kvantitativní stanovení fenytoinu in vitro v lidském séru nebo plazmě.
Metoda:
Při tomto stanovení fenytoinu se využívá technologie rekombinantní DNA (patent USA č. 4708929), která vytváří jedinečný homogenní systém enzymové imunoanalýzy.
Stanovení je založeno na bakteriálním enzymu ß-galaktosidáze, který byl genetickou modifikací rozdělen na dva neaktivní fragmenty. Tyto fragmenty spontánně reasociují a vytvářejí plně aktivní enzym, který za podmínek stanovení štěpí substrát. Přitom dochází ke změně barvy, kterou lze spektrofotometricky měřit.
Při stanovení analyt ve vzorku soutěží s analytem konjugovaným s jedním neaktivním fragmentem ß-galaktosidázy o vazebné místo protilátky. Je-li analyt ve vzorku přítomen, váže se na protilátku. Neaktivní enzymové fragmenty zůstávají volné a mohou tak vytvořit aktivní enzym. Pokud analyt ve vzorku přítomen není, protilátka se váže na analyt konjugovaný s neaktivním fragmentem, což inhibuje reasociaci neaktivních fragmentů ß-galaktosidázy a žádný aktivní enzym se netvoří.
Množství vytvořeného aktivního enzymu a výsledná změna absorbance jsou přímo úměrné množství léku přítomného ve vzorku.
