ELISA souprava je určená pro kvantitativní stanovení volných lehkých řetězců Kappa a Lambda v séru, plazmě nebo moči.
Molekuly lidského imunoglobulinu sestávají ze dvou identických těžkých řetězců, které určují imunoglobulinovou třídu (IgG, IgA, IgM, IgD a IgE) a identických lehkých řetězců (kappa nebo lambda), které jsou s těžkými řetězci vázány kovalentně. V séru zdravých jedinců se většina lehkých řetězců vyskytuje ve formě vázané k řetězci těžkému. Nicméně, v séru zdravých jedinců se také mohou vyskytovat nízké hladiny volných lehkých řetězců (free light chain – FLC), jako důsledek jejich nadprodukce B-buňkami nad řetězci těžkými. V séru se FLC kappa vyskytuje především jako monomer s molekulovou hmotností 22,5 kDa a FLC lambda jako dimer s molekulovou hmotností 45 kDa. Tyto velikosti vedou k rozdílné glomerulární filtraci, proto je v séru poměr FLC kappa k FLC lambda 1:1,6. FLC se vyskytují také v moči, ale filtrace a reabsorpce nízkomolekulárních proteinů v ledvinách silně ovlivňuje jejich koncentraci, proto hladiny FLC v moči jsou u zdravých jedinců nízké.
FLC jsou vlastními produkty B lymfocytů, a jako takové představují unikátní biomarker neoplastických a jiných poruch souvisejících s B buňkami. Zvýšené hodnoty FLC jsou spojovány s maligní plazmocelulární dyskrazií a dalšími lymfoproliferativními poruchami. Detekce FLC je důležitou diagnostickou pomůckou pro různé monoklonální gamapatie, jako je mnohočetný myelom, Waldenströmova makroglobulinémie, nesekretoriské formy myelomu, doutnající mnohočetný myelom, monoklonální gamapatie nejistého významu (MGUS). Přesné měření monoklonálních volných lehkých řetězců v séru nebo v moči je zvláště důležité v případě nemoci z lehkých řetězců (LCD), primární systémové amyloidóze (AL) a nemoci z ukládání lehkých řetězů (LCDD).
Schopnost kvantifikovat monoklonální FLC může být užitečná pro sledování těchto onemocnění. U pacientů s nemocí z lehkého řetězce je dominantně produkován buď kappa nebo lambda lehký řetězec, výsledkem je pak výrazná změna v poměru κ / λ FLC v časné fázi tohoto onemocnění. Pro identifikaci a sledování B-buněčných malignit je také velmi důležitá detekce monoklonálních kappa nebo lambda imunoglobulinových volných lehkých řetězců, také známých jako Bence Jones proteiny (BJP) v moči.
Ve srovnání se stavem zdravým jedinců výrazně roste syntéza polyklonálních FLC i při stavech, kdy dochází k aktivaci B buněk, jak bylo zjištěno u některých zánětlivých nebo autoimunitních onemocnění (např. systémový lupus erythematosus, revmatoidní artritida nebo roztroušená skleróza, stejně jako v případě rakoviny, diabetu mellitu a AIDS).
Typ: sendvičová ELISA s protilátkou značenou biotinem
Požadavek na vzorek: 2x 5 µl/jamka
Celková doba analýzy je kratší než tři a půl hodiny
Klinické použití a oblasti zkoumání:
-Onkologie
-poruchy s B buňkami
-autoimunitní onemocnění
Dokumenty naleznete zde.
