Chromogenní médium E.coli-Coliforms

Chromogenní médium E. coli-Coliforms je selektivní médium pro detekci E. coli a dalších koliformních bakterií ve vodách a potravinách. Izolace a stanovení počtu Escherichia coli a koliformních bakterií jsou důležitými ukazateli hygieny životního prostředí a potravin.

Vzájemné působení složek média, jako je pepton, sorbitol a pyruvát, umožňuje rychlý růst kolonií, včetně infekčních koliformních bakterií, a rovněž umožňuje obnovu subletálních tepelně poškozených koliformních bakterií. Tergitol-7 inhibuje grampozitivní bakterie a některé gramnegativní bakterie, aniž by ovlivnil koliformní bakterie. Chlorid sodný udržuje osmotickou rovnováhu a fosforečnanové soli působí jako pufrační systém. Bakteriologický agar je zpevňující činidlo.

Detekce ß-glukuronidázy se široce používá k rozlišení Escherichia coli, protože tento enzym je přítomen u E. coli, ale ne u ostatních členů skupiny koliformních bakterií. Chromogenní směs obsahuje chromogenní substráty: Salmon-GAL a X-glukuronid. Produkované koliformní enzymy, ß-D-galaktosidáza a ß-D-glukuronidáza, štěpí tyto substráty, což vede k rozdílnému zbarvení kolonií bakterií. ß-D-galaktosidáza štěpí substrát Salmon-GAL a dává koloniím koliformních bakterií lososově červenou barvu. ß-D-glukuronidáza, enzym charakteristický pro E. coli, štěpí X-glukuronid, což dává těmto koloniím modrou barvu. E. coli má oba enzymy a štěpí obě chromogenní látky, což dává koloniím tmavě modrou až fialovou barvu. Celkové koliformní bakterie jsou součtem kolonií E. coli a kolonií lososově červené barvy. Přídavek tryptofanu do média umožňuje provedení indolového testu pro další potvrzení E. coli.

Poznámka: Některé kmeny Shigella obsahují enzym ß-D-glukuronidázu a mohou růst jako světle modré kolonie. Negativní kolonie E. coli s b-ß-glukuronidázou jsou lososové, např. E. coli O157:H7.